Botox działa poprzez wstrzykiwanie do mięśni toksyny botulinowej, czyli naturalnej, silnej toksyny, która hamuje uwalnianie acetylocholiny (neuroprzekaźnika odpowiedzialnego za przekazywanie impulsów między nerwami i mięśniami). Substancja blokuje połączenia między sygnałami nerwowymi, które każą mięśniom się kurczyć. Działa tylko w obrębie mięśni, do których został wstrzyknięty, podczas gdy pozostałe mięśnie funkcjonują jak poprzednio.